Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis (2) භාවිතා කරන විට සලකා බැලිය යුතු කරුණු කිහිපයක්

අපි පසුගිය සතියේ සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්‍යුත් විච්ඡේදනය භාවිතා කිරීම සඳහා සලකා බැලීම් කිහිපයක් බෙදා ගත්තෙමු, ඔබේ යොමුව සඳහා අපි මෙම මාතෘකාව අද මෙතැනින් අවසන් කරන්නෙමු.

තෝරා ගැනීම බෆර් සාන්ද්රණය

සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේදී භාවිතා කරන බෆර සාන්ද්‍රණය සාමාන්‍යයෙන් කඩදාසි විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේදී භාවිතා කරන සාන්ද්‍රණයට වඩා අඩුය. බහුලව භාවිතා වන pH අගය 8.6Barbital buffer සාමාන්‍යයෙන් 0.05 mol/L සිට 0.09 mol/L දක්වා පරාසයක් තුළ තෝරා ගනු ලැබේ. සාන්ද්රණය තෝරාගැනීමේදී, මූලික තීරණයක් ගනු ලැබේ. උදාහරණයක් ලෙස, ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් කුටියේ ඉලෙක්ට්‍රෝඩ අතර පටල තීරුවේ දිග 8-10cm නම්, පටල දිග සෙන්ටිමීටරයකට 25V වෝල්ටීයතාවයක් අවශ්‍ය වන අතර වත්මන් තීව්‍රතාවය පටල පළල සෙන්ටිමීටරයකට 0.4-0.5 mA විය යුතුය. විද්යුත් විච්ඡේදනය අතරතුර මෙම අගයන් සාක්ෂාත් කර නොගතහොත් හෝ ඉක්මවා නොගියහොත්, බෆර සාන්ද්රණය වැඩි කිරීම හෝ තනුක කළ යුතුය.

අධික ලෙස අඩු බෆර සාන්ද්‍රණයක් පටිවල වේගවත් චලනයකට සහ කලාප පළල වැඩි වීමට හේතු වේ. අනෙක් අතට, අධික ලෙස ඉහළ බෆර සාන්ද්‍රණයක් කලාප සංක්‍රමණය මන්දගාමී කරනු ඇත, සමහර වෙන්වීම් පටි වෙන්කර හඳුනා ගැනීම දුෂ්කර කරයි.

සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේ දී සැලකිය යුතු තාප ප්‍රමාණයක් උත්පාදනය කරන නියැදිය හරහා ධාරාවේ සැලකිය යුතු කොටසක් සිදු කරන බව සැලකිල්ලට ගත යුතුය. සමහර විට, තෝරාගත් බෆර සාන්ද්‍රණය සුදුසු යැයි සැලකිය හැක. කෙසේ වෙතත්, පාරිසරික උෂ්ණත්වය ඉහළ යාමේ තත්වයන් යටතේ හෝ වැඩි වෝල්ටීයතාවයක් භාවිතා කරන විට, තාපය හේතුවෙන් ජලය වාෂ්පීකරණය තීව්‍ර විය හැකි අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස අධික බෆර සාන්ද්‍රණයක් ඇති වන අතර පටලය වියළීමට පවා හේතු වේ.

නියැදි පරිමාව

සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේදී, විද්‍යුත් විච්ඡේදක තත්ත්වයන්, නියැදියේම ගුණ, පැල්ලම් කිරීමේ ක්‍රම සහ හඳුනාගැනීමේ ක්‍රම ඇතුළු විවිධ සාධක මගින් නියැදි පරිමාවේ ප්‍රමාණය තීරණය වේ. සාමාන්‍ය මූලධර්මයක් ලෙස, හඳුනාගැනීමේ ක්‍රමය වඩාත් සංවේදී වන තරමට, නියැදි පරිමාව කුඩා විය හැකි අතර, එය වෙන් කිරීම සඳහා වාසිදායක වේ. නියැදි පරිමාව අධික නම්, විද්‍යුත් විච්ඡේදක රටා පැහැදිලි නොවිය හැකි අතර, පැල්ලම් කිරීම ද කාලය ගත විය හැක. කෙසේ වෙතත්, elution colorimetric හඳුනාගැනීමේ ක්‍රම භාවිතයෙන් වෙන් කරන ලද පැල්ලම් සහිත පටි ප්‍රමාණාත්මකව විශ්ලේෂණය කරන විට, නියැදි පරිමාව ඉතා කුඩා නොවිය යුතුය, එය සමහර සංරචක සඳහා අඩු අවශෝෂණ අගයන් ඇති කළ හැකි අතර, ඒවායේ අන්තර්ගතය ගණනය කිරීමේදී ඉහළ දෝෂ ඇති කරයි. එවැනි අවස්ථාවන්හිදී, නියැදි පරිමාව නිසි ලෙස වැඩි කළ යුතුය.

සාමාන්‍යයෙන්, නියැදි යෙදුම් රේඛාවේ සෑම සෙන්ටිමීටරයකටම එකතු කරන ලද නියැදි පරිමාව 0.1 සිට 5 μL දක්වා පරාසයක පවතී, එය 5 සිට 1000 μg නියැදි ප්‍රමාණයකට සමාන වේ. උදාහරණයක් ලෙස, සාමාන්‍ය සෙරුම් ප්‍රෝටීන් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් විශ්ලේෂණයේදී, යෙදුම් රේඛාවේ සෑම සෙන්ටිමීටරයකටම එකතු කරන ලද නියැදි පරිමාව සාමාන්‍යයෙන් 1 μL නොඉක්මවන අතර එය ප්‍රෝටීන් 60 සිට 80 μg ට සමාන වේ. කෙසේ වෙතත්, එකම ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරසිස් ක්‍රමය භාවිතා කරමින් ලිපොප්‍රෝටීන හෝ ග්ලයිකොප්‍රෝටීන විශ්ලේෂණය කිරීමේදී, නියැදි පරිමාව ඊට අනුරූපව වැඩි කළ යුතුය.

අවසාන වශයෙන්, මූලික අත්හදා බැලීම් මාලාවක් හරහා නිශ්චිත කොන්දේසි මත පදනම්ව වඩාත් සුදුසු නියැදි පරිමාව තෝරා ගත යුතුය.

පැල්ලම් විසඳුම තෝරා ගැනීම

සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේ වෙන් කරන ලද පටි සාමාන්‍යයෙන් හඳුනා ගැනීමට පෙර පැල්ලම් කරනු ලැබේ. විවිධ නියැදි සංරචක සඳහා විවිධ පැල්ලම් කිරීමේ ක්‍රම අවශ්‍ය වන අතර, සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් සඳහා සුදුසු පැල්ලම් කිරීමේ ක්‍රම පෙරහන් කඩදාසි සඳහා සම්පූර්ණයෙන්ම අදාළ නොවේ.

1-3

පැල්ලම් විසඳුමක් තෝරා ගැනීමට ප්රධාන මූලධර්ම තුනක් තිබේසෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය. පළමුව,ඇල්කොහොල්-ද්‍රාව්‍ය ඩයි වර්ගවලට වඩා ජලයේ ද්‍රාව්‍ය ඩයි වර්ග වඩාත් ප්‍රිය කළ යුතු අතර, පටල හැකිලීම සහ දෙවැන්නේ පැල්ලම් ද්‍රාවණයෙන් ඇති වන විරූපණය වළක්වා ගත යුතුය. පැල්ලම් කිරීමෙන් පසු, පටලය ජලයෙන් සේදීම සහ පැල්ලම් කාලය අවම කිරීම වැදගත් වේ. එසේ නොමැති නම්, පටලය රැලි ගැසීම හෝ හැකිලීම සිදු විය හැක, එය පසුව හඳුනා ගැනීමට බලපානු ඇත.

දෙවනුව, නියැදිය සඳහා ශක්තිමත් පැල්ලම් සහිත ඩයි වර්ග තෝරා ගැනීම වඩාත් සුදුසුය. සෙරුමය ප්‍රෝටීන වල සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේදී, ඇමයිනෝ කළු 10B බහුලව භාවිතා වන්නේ විවිධ සෙරුමය ප්‍රෝටීන් සංරචක සඳහා එහි ඇති දැඩි පැල්ලම් සම්බන්ධය සහ එහි ස්ථායීතාවය නිසාය.

තෙවනුව, විශ්වසනීය ගුණාත්මක ඩයි වර්ග තෝරා ගත යුතුය. සමහර ඩයි වර්ග, එකම නම තිබියදීත්, පැල්ලම් කිරීමෙන් පසු විශේෂයෙන් අඳුරු පසුබිමක් ඇති කරන අපද්රව්ය අඩංගු විය හැක. මෙය මුලින් හොඳින් වෙන් වූ පටි පවා බොඳ කළ හැකි අතර, ඒවා වෙන්කර හඳුනා ගැනීමට අපහසු වේ.

අවසාන වශයෙන්, පැල්ලම් විසඳුම් සාන්ද්රණය තෝරාගැනීම වැදගත් වේ. න්‍යායාත්මකව, ඉහළ පැල්ලම් ද්‍රාවණ සාන්ද්‍රණයක් නියැදි සංරචක වඩාත් හොඳින් පැල්ලම් කිරීමට සහ වඩා හොඳ පැල්ලම් කිරීමේ ප්‍රතිඵලවලට තුඩු දෙනු ඇති බව පෙනේ. කෙසේ වෙතත්, මෙය එසේ නොවේ. සාම්පල සංරචක සහ සායම් අතර බන්ධන සම්බන්ධතාවය යම් සීමාවක් ඇත, එය පැල්ලම් ද්‍රාවණ සාන්ද්‍රණය වැඩි වීමත් සමඟ වැඩි නොවේ. ඊට පටහැනිව, අධික ලෙස ඉහළ පැල්ලම් ද්‍රාවණ සාන්ද්‍රණයක් සායම් නාස්ති කරනවා පමණක් නොව පැහැදිලි පසුබිමක් ලබා ගැනීම දුෂ්කර කරයි. තවද, වර්ණ තීව්‍රතාවය නිශ්චිත උපරිම අගයකට ළඟා වූ විට, විශේෂයෙන් ප්‍රමාණාත්මක මිනුම් වලදී, වර්ණකයේ අවශෝෂණ වක්‍රය රේඛීය සම්බන්ධතාවයක් අනුගමනය නොකරයි.සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේදී, කඩදාසි විද්‍යුත් විච්ඡේදනයේදී භාවිතා කරන සාන්ද්‍රණයට වඩා පැල්ලම් ද්‍රාවණ සාන්ද්‍රණය සාමාන්‍යයෙන් අඩුය.

3

Beijing Liuyi Biotechnology ගැන දැන ගැනීමට විස්තර's සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලයelectrophoresis ටැංකිය සහ එහි electrophoresis යෙදුම, කරුණාකර මෙහි පිවිසෙන්න:

එල්සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය මගින් සෙරුමය ප්‍රෝටීන් වෙන් කිරීම සඳහා අත්හදා බැලීම

එල්සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්යුත් විච්ඡේදනය

එල්Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis (1) භාවිතා කරන විට සලකා බැලිය යුතු කරුණු කිහිපයක්

ඔබට අපගේ නිෂ්පාදන සඳහා කිසියම් මිලදී ගැනීමේ සැලැස්මක් තිබේ නම්, කරුණාකර අප හා සම්බන්ධ වීමට පසුබට නොවන්න. ඔබට විද්‍යුත් තැපෑලෙන් අපට පණිවිඩ එවිය හැක[ඊමේල් ආරක්ෂිත]හෝ[ඊමේල් ආරක්ෂිත], හෝ කරුණාකර +86 15810650221 ට අප අමතන්න හෝ Whatsapp +86 15810650221, හෝ Wechat: 15810650221 එක් කරන්න.

යොමුව:Li. මහතා විසින් Electrophoresis(දෙවන සංස්කරණය)


පසු කාලය: ජූනි-06-2023