Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis මගින් සෙරුමය ප්‍රෝටීන් වෙන් කිරීම සඳහා අත්හදා බැලීම

මූලධර්මය

සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් යනු සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලයක් ආධාරකයක් ලෙස භාවිතා කරන විද්‍යුත් විච්ඡේදක ක්‍රමයකි.විද්යුත් ක්ෂේත්රයේ ක්රියාකාරිත්වය යටතේ ආරෝපිත අංශු ප්රතිවිරුද්ධ ඉලෙක්ට්රෝඩය දෙසට ගමන් කරන සංසිද්ධිය විද්යුත් විච්ඡේදනය ලෙස හැඳින්වේ.සෑම ප්‍රෝටීනයකටම නිශ්චිත සමවිද්‍යුත් ලක්ෂ්‍යයක් ඇති බැවින්, ප්‍රෝටීනයක් එහි සම විද්‍යුත් ලක්ෂ්‍යයට වඩා අඩු pH අගයක් සහිත ද්‍රාවණයක තැබුවහොත්, ප්‍රෝටීනය ධන ආරෝපණය වී සෘණ ඉලෙක්ට්‍රෝඩය දෙසට ගමන් කරයි.ඊට පටහැනිව, එය ධනාත්මක ධ්රැවයට ගමන් කරයි.විද්‍යුත් ක්ෂේත්‍රයක චලනය වන ප්‍රෝටීන් අණු වල වේගය ඒවායේ ආරෝපණය, අණු වල හැඩය සහ ප්‍රමාණය හා සම්බන්ධ වන නිසා ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරසිස් මගින් විවිධ ප්‍රෝටීන වෙන් කළ හැක.සෙරුමය තුළ විවිධ ප්‍රෝටීන අඩංගු වන අතර, ඒ සියල්ලෙහිම pH7.5 හෝ ඊට අඩු සම විද්‍යුත් ලක්ෂ්‍ය ඇත.විද්‍යුත් විච්ඡේදනය ක්‍රියාත්මක කිරීම සඳහා සෙරුමය pH 8.6 බෆරයේ තැබූ විට, සියලුම සෙරුමය ප්‍රෝටීන සෘණ ආරෝපණය වන අතර විද්‍යුත් ක්ෂේත්‍රයේ ධනාත්මක පැත්තට ගමන් කරයි.විවිධ මස්තු ප්‍රෝටීන එකම pH අගයකදී විවිධ ආරෝපණ ඇති බැවින්, අණුක අංශු ප්‍රමාණයෙන් වෙනස් වන අතර, ඒ අනුව සංක්‍රමණ වේගය වෙනස් වන අතර, ඒවා ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් මගින් වෙන් කරනු ලැබේ.සෙරුමය ප්‍රෝටීන වල සමවිද්‍යුත් ලක්ෂ්‍ය සහ අණුක බර පහත වගුවේ දක්වා ඇත:

ප්රෝටීන්

සම විද්‍යුත් ලක්ෂ්‍ය (PI)

අණුක බර

ඇල්බියුමින්

4.88

69 000

α1-ග්ලූලින්

5.00

200 000

α2-ග්ලූලින්

5.06

300 000

β-ග්ලූලින්

5.12

9 000 ~ 150 000

γ-ග්ලූලින්

6.85~7.50

156 000~ 300 000

1

පර්යේෂණය වන්නේ සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය (abbr. CAM) ආධාරක මාධ්‍ය ලෙස රුධිර සෙරුමය තුළ විවිධ ප්‍රෝටීන වෙන් කිරීමයි.CAM යනු පෙණ දමන ලද ලූස් වර්ගයකිeහොඳ නිල ඇඳුමක් සහිත චිත්රපටයක්, සහ ඝනකම 0.1mm-1.5mm, යම් ජල අවශෝෂණයක් ඇත.

CAM Electrophoresis සඳහා ද්රව්ය, උපකරණ සහ ප්රතික්රියාකාරක

සාම්පල:නිරෝගී මිනිස් රුධිර සෙරුමය

උපකරණය:බල සැපයුම DYY-6C, electrophoresis ටැංකිය DYCP-38C, සුපිරි නියැදි පැටවීම WD-9404

1-4

ප්රතික්රියාකාරක

1) සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය 7X9cm

2) PH 8.6 barbitol බෆර ද්‍රාවණය (අයන ශක්තිය 0.05-0.09, එය 0.06tid කාලය.): 1,84g Diethyl barbituric අම්ලය ගන්න, ඉන්පසු 1.03g Diethyl සෝඩියම් pentobarbital ගන්න, දිය වීමට රත් කිරීමට ආස්රැත ජලය ටිකක් එකතු කර සාදා ගන්න. මිලි ලීටර් 1000 දක්වා;

3) පැල්ලම්: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, 100ml ආසවනය කළ ජලය එක් කරන්න;

4) TBS/T හෝ PBS/T: 45ml 95% එතනෝල්, 5ml ග්ලැසියර ඇසිටික් අම්ලය, 50ml ආසවනය කළ ජලය එක් කරන්න;

5) පිරිසිදු කිරීමේ විසඳුම: නිර්ජලීය එතනෝල් මිලි ලීටර් 70, ග්ලැසියර ඇසිටික් අම්ලය මිලි ලීටර් 30.

මෙතෝ අත්හදා බැලීමd

1) පටලය පිළියෙළ කරන්න: මිනිත්තු 30-8 පැය බාර්බිටෝල් බෆර ද්‍රාවණය තුළ පටලය ගිල්වා, එය පිටතට ගන්න, අවශෝෂක කඩදාසි මගින් අමතර ද්‍රාවණය ඉවත් කරන්න.

2) සාම්පල පැටවීම: පටලයේ රළු පැත්ත සහ සිනිඳු පැත්ත වෙන්කර හඳුනාගෙන රළු පැත්තේ ඉහළ කෙළවරට සෙන්ටිමීටර 1.5 ක දුරින් රේඛාවක් සලකුණු කරන්න.රළු පැත්තේ උසස් නියැදි පැටවීමේ මෙවලම මගින් සාම්පල පූරණය කරන්න.සටහන: සාම්පල පටලයේ රළු පැත්තට පැටවිය යුතුය.සෙරුමය සාම්පල සම්පූර්ණයෙන්ම පටලයට විනිවිද ගිය පසු, පටලය පෙරළන්න, රළු පැත්ත (සාම්පල සහිත) ටැංකියට මුහුණට මුහුණලා, සාම්පල සහිත අවසානය සෘණ ඉලෙක්ට්රෝඩයේ තබා ඇත.

3) Electrophoresis: බල සැපයුම සක්රිය කරන්න, 0.40.6m A/cm පටලය, ධාවන කාලය විනාඩි 30-45 කි.Electrophoresis ක්රියාත්මක කිරීමෙන් පසුව, බලය අක්රිය කරන්න.

4) පැල්ලම් සහ පිරිසිදු කරන්න: ටැංකියෙන් පටලය ඉවතට ගෙන ගිල්වන්නit සායම් ද්‍රාවණයට මිනිත්තු 5ක් යොදන්න, ඉන්පසු පසුබිමේ වර්ණය පැහැදිලි වන තුරු 3-4 වතාවක් පිරිසිදු කිරීමේ ද්‍රාවණය තුළ එය පිරිසිදු කරන්න.මස්තු ප්‍රෝටීන පටි මත පෙන්විය යුතු අතර, සාමාන්‍යයෙන් කලාප පහක් ඇති අතර, සලකුණු රේඛාවේ ඉහළ කෙළවර සාදයි, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.

5) කල් තබා ගැනීම: වියළි ඉලෙක්ට්‍රොෆොරෙසිස් දමන්නසංගීත කණ්ඩායමමිනිත්තු 10-15 ක් පිරිසිදු කිරීමේ විසඳුමක දී, පසුව එය පිටතට ගෙන පිරිසිදු වීදුරුවක් මත එය ඇලවීම, එය වියළීමෙන් පසු, එය විනිවිද පෙනෙන චිත්රපටයක් බවට පත්වේ.සංගීත කණ්ඩායම.

අත්හදා බැලීමප්රතිඵලය

1-3

සෙරුමය සාම්පලවල වෙන් කිරීමේ බලපෑම යහපත් වන අතර, බෑන්ඩ් වලිග සංසිද්ධියක් නොමැත.පරීක්ෂණ ක්‍රියා පටිපාටි සහ පරීක්ෂණ කරන්නාගේ ක්‍රම නිසා ප්‍රතිඵලවල පුනරාවර්තන හැකියාව වෙනස් වන අතර පුනරාවර්තන හැකියාව ඉහළයි.

නිගමනය

වේගවත් සායනික ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරසිස් හඳුනාගැනීමේ පද්ධතිය (ඉලෙක්ට්රෝෆොරේසිස් ටැංකියDYCP-38C,බල සැපයුමDYY-6C සහ සුපිරි නියැදි පැටවීම WD-9404) අපගේ නිෂ්පාදනයසමාගම Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdපර්යේෂණාත්මක අවශ්‍යතා සපුරාලයි,සහප්‍රතිඵල ප්‍රතිනිෂ්පාදනය කළ හැකි, සරල සහ වේගවත්, සුදුසු වේඉගැන්වීමපර්යේෂණ.

බීජිං ලියුයිBiotechnology Co., Ltd ජීව විද්‍යා කර්මාන්තය සඳහා විද්‍යුත් විච්ඡේදක නිෂ්පාදන නිෂ්පාදනය සඳහා විශේෂීකරණය කරයි.චීනයේ වසර 50 කට වැඩි ඉතිහාසයක් ඇති අතර සමාගමට ලොව පුරා ස්ථාවර සහ උසස් තත්ත්වයේ නිෂ්පාදන සැපයිය හැකිය.වසර ගණනාවක සංවර්ධනය හරහා, එය ඔබේ තේරීමට සුදුසුයි!

අපි දැන් හවුල්කරුවන් සොයමින් සිටිමු, OEM ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් ටැංකිය සහ බෙදාහරින්නන් යන දෙකම සාදරයෙන් පිළිගනිමු.

අප ගැන වැඩි විස්තර සඳහා කරුණාකර විද්‍යුත් තැපෑලෙන් අප හා සම්බන්ධ වන්න[ඊමේල් ආරක්ෂිත]හෝ[ඊමේල් ආරක්ෂිත].


පසු කාලය: නොවැම්බර්-14-2022