Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gel electrophoresis යනු DNA, RNA සහ ප්රෝටීන වැනි සාර්ව අණු වෙන් කිරීමට ඉඩ සලසන ජීව විද්‍යාත්මක විෂයයන් හරහා රසායනාගාරවල ඇති මූලික තාක්ෂණයකි. විවිධ වෙන්කිරීමේ මාධ්‍ය සහ යාන්ත්‍රණයන් මෙම අණුවල උප කුලක ඒවායේ භෞතික ලක්ෂණ උපයෝගී කරගනිමින් වඩාත් ඵලදායී ලෙස වෙන් කිරීමට ඉඩ සලසයි. විශේෂයෙන් ප්රෝටීන සඳහා, පොලිඇක්‍රිලමයිඩ් ජෙල් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් (PAGE) බොහෝ විට තෝරා ගැනීමේ තාක්ෂණය වේ.
PAGE යනු ප්රෝටීන වැනි සාර්ව අණු ඒවායේ විද්යුත් විච්ඡේදක සංචලනය, එනම් ප්‍රතිවිරුද්ධ ආරෝපණයේ ඉලෙක්ට්‍රෝඩයක් දෙසට ගමන් කිරීමට විශ්ලේෂකයන්ගේ හැකියාව මත පදනම්ව වෙන් කරන තාක්ෂණයකි. PAGE හි, මෙය අණුවේ ආරෝපණය, ප්රමාණය (අණුක බර) සහ හැඩය අනුව තීරණය වේ. පොලිඇක්‍රිලමයිඩ් ජෙල් වල පිහිටුවා ඇති සිදුරු හරහා විශ්ලේෂක ගමන් කරයි. DNA සහ RNA මෙන් නොව, ප්රෝටීන් සංස්ථාපිත ඇමයිනෝ අම්ල අනුව ආරෝපණය වේ, ඒවා ක්රියාත්මක වන ආකාරය කෙරෙහි බලපෑම් කළ හැකිය. ඇමයිනෝ අම්ල නූල් ඒවායේ පෙනෙන ප්‍රමාණයට බලපාන ද්විතියික ව්‍යුහයන් ද සෑදිය හැකි අතර එමඟින් සිදුරු හරහා ගමන් කිරීමට ඔවුන්ට හැකි වේ. එබැවින් ප්රමාණය පිළිබඳ වඩාත් නිවැරදි තක්සේරුවක් අවශ්ය නම් ඒවා රේඛීයකරණය කිරීම සඳහා විද්යුත් විච්ඡේදනයට පෙර ප්රෝටීන ප්‍රතිනිර්මාණය කිරීම යෝග්‍ය වේ.
SDS පිටුව
Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis යනු 5 සිට 250 kDa ස්කන්ධ ප්රෝටීන් අණු වෙන් කිරීමට භාවිතා කරන තාක්ෂණයකි. ප්රෝටීන වෙන් කරනු ලබන්නේ ඒවායේ අණුක බර මත පමණි. සෝඩියම් ඩොඩෙසිල් සල්ෆේට්, ඇනොනික් සර්ෆැක්ටන්ට්, ප්රෝටීන් සාම්පලවල ආවේණික ආරෝපණ ආවරණය කරන ජෙල් සැකසීමේදී එකතු කරන අතර ඒවාට ස්කන්ධ අනුපාතයට සමාන ආරෝපණයක් ලබා දේ. සරල වචන වලින් කිවහොත්, එය ප්රෝටීන නැති කර ඒවාට සෘණ ආරෝපණයක් ලබා දෙයි.
ස්වදේශික පිටුව
Native PAGE යනු ප්රෝටීන වෙන් කිරීම සඳහා denatured නොවන ජෙල් භාවිතා කරන තාක්ෂණයකි. SDS PAGE මෙන් නොව, ජෙල් සැකසීමේදී denturing කාරකයක් එකතු නොවේ. එහි ප්රතිඵලයක් වශයෙන්, ප්රෝටීන් වෙන් කිරීම ප්රෝටීන් වල ආරෝපණ සහ ප්රමාණය මත සිදු වේ. මෙම තාක්‍ෂණයේදී, ප්‍රෝටීනවල අනුකූලතාව, නැමීම සහ ඇමයිනෝ අම්ල දාමයන් වෙන්වීම රඳා පවතින සාධක වේ. මෙම ක්රියාවලියේදී ප්රෝටීන වලට හානි සිදු නොවන අතර, වෙන්වීම අවසන් වූ පසු නැවත ලබා ගත හැක.
Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ක්‍රියා කරන්නේ කෙසේද?
PAGE හි මූලික මූලධර්මය වන්නේ විද්යුත් ධාරාවක් භාවිතයෙන් පොලිඇක්‍රිලමයිඩ් ජෙල් වල සිදුරු හරහා විශ්ලේෂණ වෙන් කිරීමයි. මෙය සාක්ෂාත් කර ගැනීම සඳහා, ඇමෝනියම් පර්සල්ෆේට් (APS) එකතු කිරීම මගින් ඇක්‍රිලමයිඩ්-බිසැක්‍රිලමයිඩ් මිශ්‍රණයක් බහුඅවයවීකරණය කරනු ලැබේ (පොලිඇක්‍රිලමයිඩ්). tetramethylethylenediamine (TEMED) මගින් උත්ප්‍රේරණය කරන ලද ප්‍රතික්‍රියාව, විශ්ලේෂකයන්ට චලනය විය හැකි සිදුරු සහිත දැලක් වැනි ව්‍යුහයක් සාදයි (රූපය 2). ජෙල් වල අඩංගු සම්පූර්ණ ඇක්‍රිලමයිඩ් ප්‍රතිශතය වැඩි වන තරමට සිදුරු ප්රමාණය කුඩා වන අතර එම නිසා කුඩා ප්රෝටීන හරහා ගමන් කළ හැකිය. ඇක්‍රිලමයිඩ් සහ බයිසැක්‍රිලමයිඩ් අනුපාතය සිදුරු ප්‍රමාණයට බලපාන නමුත් මෙය බොහෝ විට නියතව පවතී. කුඩා සිදුරු ප්‍රමාණයන් කුඩා ප්රෝටීන වලට ජෙල් හරහා ගමන් කිරීමේ වේගය අඩු කරයි, ඒවායේ විභේදනය වැඩි දියුණු කරයි සහ ධාරාව යොදන විට ඒවා වේගයෙන් බෆරය තුළට දිව යාම වළක්වයි.
Polyacrylamide Gel Electrophoresis සඳහා උපකරණ
ජෙල් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් සෛලය (ටැංකිය/කුටිය)
Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) සඳහා වන ජෙල් ටැංකිය ඇගරෝස් ජෙල් ටැංකියට වඩා වෙනස් වේ. ඇගරෝස් ජෙල් ටැංකිය තිරස් වන අතර PAGE ටැංකිය සිරස් වේ. සිරස් විද්යුත් විච්ඡේදක සෛලය (ටැංකිය/කුටිය) මගින් වීදුරු තහඩු දෙකක් අතරට තුනී ජෙල් (සාමාන්‍යයෙන් 1.0mm හෝ 1.5mm) වත් කර ජෙල් පතුල එක් කුටියක බෆරයක ගිල්වා ඉහළ කොටස බෆරයක ගිල්වන ලෙස සවිකර ඇත. වෙනත් කුටියක. ධාරාව යොදන විට, ඉහළ කුටියේ සිට පහළ කුටියට ජෙල් හරහා කුඩා බෆරයක් සංක්‍රමණය වේ. එකලස් කිරීම අවංක ස්ථානයක පවතින බව සහතික කිරීම සඳහා ශක්තිමත් කලම්ප සමඟින්, එම උපකරණ සිසිලනය සමඟ වේගවත් ජෙල් ධාවනයට පහසුකම් සපයන අතර එහි ප්රතිඵලයක් ලෙස පැහැදිලි පටි ඇතිවේ.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) පොලිඇක්‍රිලමයිඩ් ජෙල් විද්යුත් විච්ඡේදක සෛල (ටැංකි/කුටි) ප්‍රමාණයේ පරාසයක් නිෂ්පාදනය කරයි. DYCZ-20C සහ DYCZ-20G මාදිලි DNA අනුක්‍රමික විශ්ලේෂණය සඳහා සිරස් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් සෛල (ටැංකි/කුටි) වේ. DYCZ-24DN, DYCZ-25D සහ DYCZ-25E වැනි සිරස් විද්යුත් විච්ඡේදක සෛල (ටැංකි/කුටි) බ්ලොටින් පද්ධතියට අනුකූල වේ. ප්රෝටීන් අණුව ජෙල් සිට පටලයට මාරු කිරීම සඳහා යොදා ගැනේ. SDS-PAGE විද්යුත් විච්ඡේදනයට පසුව, Western Blotting යනු ප්රෝටීන් මිශ්‍රණයක නිශ්චිත ප්‍රෝටීනයක් හඳුනාගැනීමේ ක්‍රමයකි. පර්යේෂණාත්මක අවශ්‍යතා අනුව ඔබට මෙම බ්ලොටින් පද්ධති තෝරාගත හැක.
Electrophoresis බල සැපයුම
ජෙල් ක්රියාත්මක කිරීම සඳහා විදුලිය සැපයීම සඳහා, ඔබට විද්යුත් විච්ඡේදක බල සැපයුමක් අවශ්ය වනු ඇත. Liuyi Biotechnology හි අපි සියලුම යෙදුම් සඳහා ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් බල සැපයුම් පරාසයක් සපයන්නෙමු. ඉහළ ස්ථායී වෝල්ටීයතාවයක් සහ ධාරාවක් සහිත DYY-12 සහ DYY-12C ආකෘතියට අධි වෝල්ටීයතා අවශ්‍යතා විද්යුත් විච්ඡේදනය සපුරාලිය හැකිය. එය ස්ථාවරය, වේලාව, VH සහ පියවරෙන් පියවර යෙදුමේ කාර්යය ඇත. ඒවා IEF සහ DNA අනුක්‍රමික විද්යුත් විච්ඡේදක යෙදුම සඳහා වඩාත් සුදුසු වේ. සාමාන්‍ය ප්රෝටීන් සහ DNA විද්යුත් විච්ඡේදක යෙදුම සඳහා, අප සතුව DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, සහ යනාදී ආකෘති ඇත, ඒවා ද ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් සෛල (ටැංකි/කුටි) සමඟ උණුසුම් විකුණුම් බල සැපයුම් වේ. මධ්‍යම සහ අඩු වෝල්ටීයතා විද්යුත් විච්ඡේදක යෙදුම් සඳහා මේවා භාවිතා කළ හැකිය, එනම් පාසල් විද්‍යාගාර භාවිතය, රෝහල් රසායනාගාරය සහ යනාදිය. බල සැපයුම් සඳහා තවත් ආකෘති, කරුණාකර අපගේ වෙබ් අඩවියට පිවිසෙන්න.
Liuyi සන්නාමය චීනයේ වසර 50 කට වඩා වැඩි ඉතිහාසයක් ඇති අතර සමාගමට ලොව පුරා ස්ථාවර සහ උසස් තත්ත්වයේ නිෂ්පාදන සැපයිය හැකිය. වසර ගණනාවක සංවර්ධනය තුළින්, එය ඔබේ තේරීමට සුදුසුයි!
අප ගැන වැඩි විස්තර සඳහා කරුණාකර විද්යුත් තැපෑලෙන් අප හා සම්බන්ධ වන්න[ඊමේල් ආරක්ෂිත] or [ඊමේල් ආරක්ෂිත].
Polyacrylamide gel electrophoresis යනු කුමක්ද?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis, එය ක්‍රියා කරන ආකාරය, තාක්ෂණික ප්‍රභේද සහ එහි යෙදීම්
පසු කාලය: මැයි-23-2022