අත්හදා බැලීමේ මූලධර්මය
Hemoglobin electrophoresis විවිධ සාමාන්‍ය හා අසාමාන්‍ය හිමොග්ලොබින් හඳුනා ගැනීම සහ තහවුරු කිරීම අරමුණු කරයි.
විවිධ හිමොග්ලොබින් වර්ගවල විවිධ ආරෝපණ සහ සමවිද්‍යුත් ලක්ෂ්‍ය හේතුවෙන්, යම් pH බෆර ද්‍රාවණයක, හිමොග්ලොබින් සමවිද්‍යුත් ලක්ෂ්‍යය බෆර ද්‍රාවණයේ pH අගයට වඩා අඩු වූ විට, හීමොග්ලොබින් ඍණ ආරෝපණයක් ගෙන විද්යුත් විච්ඡේදනය අතරතුර ඇනෝඩය දෙසට සංක්‍රමණය වේ. අනෙක් අතට, ධන ආරෝපණයක් සහිත හීමොග්ලොබින් කැතෝඩය දෙසට ගමන් කරයි.
නිශ්චිත වෝල්ටීයතාවයක් යටතේ සහ නිශ්චිත ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරසිස් කාලයකට පසුව, විවිධ ආරෝපණ සහ අණුක බර සහිත හීමොග්ලොබින් විවිධ සංක්‍රමණ දිශාවන් සහ වේගයන් ප්‍රදර්ශනය කරයි. මෙය එකිනෙකට වෙනස් කලාප වෙන් කිරීමට ඉඩ සලසයි, පසුව විවිධ හීමොග්ලොබින් ප්‍රමාණනය කිරීම සඳහා මෙම කලාපවල වර්ණමිතික හෝ විද්යුත් විච්ඡේදක ස්කෑනිං විශ්ලේෂණය සිදු කළ හැකිය. වඩාත් බහුලව භාවිතා වන ක්රමය pH 8.6 සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්යුත් විච්ඡේදනය වේ.
සයිටොප්ලාස්මය තුළ, ග්ලයිකෝජන් හෝ පොලිසැකරයිඩ ද්‍රව්‍යවල (මුකොපොලිසැකරයිඩ, මුකොප්‍රෝටීන, ග්ලයිකොප්‍රෝටීන, ග්ලයිකොලිපිඩ් ආදිය) ඇති එතිලීන් ග්ලයිකෝල් කාණ්ඩ (CHOH-CHOH) ආවර්තිතා අම්ලය මගින් ඔක්සිකරණය වී ඇල්ඩිහයිඩ් කාණ්ඩ (CHO-CHO) බවට පරිවර්තනය වේ. මෙම ඇල්ඩිහයිඩ් කාණ්ඩ අවර්ණ දම් පාට-රතු ෂිෆ් ප්‍රතික්‍රියාකාරකය සමඟ ඒකාබද්ධ වී දම් පාට-රතු සායම් සාදමින් සෛලය තුළ පොලිසැකරයිඩ ඇති තැන්වල තැන්පත් වේ. මෙම ප්‍රතික්‍රියාව ආවර්තිතා අම්ල-ෂිෆ් (PAS) පැල්ලම් ලෙස හැඳින්වේ, කලින් ග්ලයිකෝජන් පැල්ලම් ලෙස හැඳින්වේ.
අත්හදා බැලීමේ ක්රමය
ද්රව්ය:සෙලියුලෝස් ඇසිටේට්membrane, electrophoresis උපකරණ(DYCP-38C සහ බල සැපයුම DYY-6C), සුපිරි නියැදි පැටවීමේ මෙවලම(පයිප්පෙට්), වර්ණාවලි ඡායාරූපමාන, වර්ණමිතික cuvettes, බෆර.
බෆරය:
(1) pH 8.6 TEB බෆරය: බර ග්රෑම් 10.29 ට්‍රිස්, ග්රෑම් 0.6 ඊඩීටීඒ, ග්රෑම් 3.2 බෝරික් අම්ලය, සහ ආස්රැත ජලය මිලි ලීටර් 1000 ට එක් කරන්න.
(2) බෝරේට් බෆරය: බර 6.87 ග්රෑම් බෝරික් අම්ලය සහ ග්රෑම් 5.56 බෝරික් අම්ලය, සහ ආස්රැත ජලය මිලි ලීටර් 1000 ට එකතු කරන්න.
ක්රියා පටිපාටිය:
Pහීමොග්ලොබින් විසඳුම යථා තත්ත්වයට පත් කිරීම
හෙපටින් හෝ සෝඩියම් සයිටේ්රට් අඩංගු රුධිරය මිලි ලීටර් 3 ක් ප්රතිංධිසරාේධකයක් ලෙස ගන්න. මිනිත්තු 10 ක් සඳහා 2000 rpm දී කේන්ද්රාපසාරී කර ප්ලාස්මාව ඉවතලන්න. කායික සේලයින් සමඟ රතු රුධිරාණු තුන් වරක් සෝදන්න (750 rpm, සෑම අවස්ථාවකදීම විනාඩි 5 කේන්ද්රාපසාරී). මිනිත්තු 10ක් සඳහා 2200 rpm දී කේන්ද්රාපසාරී කර අධි ප්‍රවාහය ඉවතලන්න. ආසවනය කළ ජලය සමාන ප්‍රමාණයක් එකතු කරන්න, ඉන්පසු කාබන් ටෙට්‍රාක්ලෝරයිඩ් පරිමාව මෙන් 0.5 ගුණයක් එකතු කරන්න. පසුව භාවිතය සඳහා ඉහළ Hb ද්‍රාවණය එකතු කිරීම සඳහා මිනිත්තු 5ක් තදින් සොලවන්න, ඉන්පසු විනාඩි 10ක් සඳහා 2200 rpm දී කේන්ද්රාපසාරී කරන්න.
පටලය පොඟවා ගැනීම
සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය සෙන්ටිමීටර 3 × 8 ප්‍රමාණයේ තීරු වලට කපන්න. ඒවා සම්පූර්ණයෙන්ම සංතෘප්ත වන තෙක් pH 8.6 TEB බෆරයේ පොඟවා, පසුව ඉවත් කර පෙරහන් කඩදාසිවලින් වියළා ගන්න.
පැල්ලම් කිරීම
හීමොග්ලොබින් ද්‍රාවණයෙන් 10 μl සිරස් අතට සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලයට (රළු පැත්ත) දාරයේ සිට සෙ.මී.
විද්යුත් විච්ඡේදනය
බෝරේට් බෆර් ද්‍රාවණය විද්යුත් විච්ඡේදක කුටියට වත් කරන්න. කුටියේ කැතෝඩ කෙළවරේ පැල්ලම් සහිත පැත්තක් සහිත සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය තබන්න. 200 V දී විනාඩි 30 ක් ධාවනය කරන්න.
ඉවත් කිරීම
HbA සහ HbA2 කලාප කපා, ඒවා වෙනම පරීක්ෂණ නලවල තබා, පිළිවෙලින් ආස්රැත ජලය 15 ml සහ 3 ml එකතු කරන්න. හීමොග්ලොබින් සම්පූර්ණයෙන්ම ඉවත් කිරීම සඳහා මෘදු ලෙස සොලවන්න, පසුව මිශ්ර කරන්න.
වර්ණමිතිය
ඉලියුෂන් ද්‍රාවණය සඳහා ආසවනය කළ ජලය භාවිතයෙන් අවශෝෂණය ශුන්‍ය කර අවශෝෂණය 415 nm හිදී මැනිය.
ගණනය කිරීම
HbA2(%) = HbA2 නල අවශෝෂණය / (HbA නලයේ අවශෝෂණය × 5 + HbA2 නල අවශෝෂණය) × 100%
පර්යේෂණාත්මක ප්රතිඵල ගණනය කිරීම
pH 8.6 TEB බෆර් සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් සඳහා යොමු පරාසය: HbA > 95%, HbA2 1%-3.1%
සටහන්
Electrophoresis කාලය ඉතා දිගු නොවිය යුතුය. විද්යුත් විච්ඡේදනය අතරතුර සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය වියළී නොයා යුතුය. HbA සහ HbA2 පැහැදිලිව වෙන් වූ විට විද්යුත් විච්ඡේදනය නවත්වන්න. දිගු ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් කලාප විසරණය හා බොඳ වීමට හේතු විය හැක.
ඕනෑවට වඩා සාම්පල භාවිතා කිරීමෙන් වළකින්න. අධික හීමොග්ලොබින් ද්‍රවයක් පටි වෙන්වීම හෝ ප්‍රමාණවත් නොවීම සඳහා හේතු විය හැක, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ව්‍යාජ ලෙස HbA මට්ටම ඉහළ යයි.
ප්‍රෝටීන සමඟ සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලය දූෂණය වීම වළක්වන්න.
ධාරාව ඉතා ඉහළ නොවිය යුතුය; එසේ නොමැති නම්, හිමොග්ලොබින් පටි වෙන් නොවිය හැක.
සෑම විටම සාමාන්‍ය පුද්ගලයින්ගේ නිදර්ශක සහ අවශ්‍ය අසාමාන්‍ය හිමොග්ලොබින් පාලනයන් ලෙස ඇතුළත් කරන්න.
බීජිං ලියුයි ජෛව තාක්‍ෂණය මගින් හිමොග්ලොබින් විද්යුත් විච්ඡේදනය සඳහා වෘත්තීය විද්යුත් විච්ඡේදක ටැංකිය නිෂ්පාදනය කරයි.DYCP-38Cසෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්යුත් විච්ඡේදක ටැංකිය, සහ සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටල විද්යුත් විච්ඡේදක ටැංකිය සඳහා විද්යුත් විච්ඡේදක බල සැපයුමේ ආකෘති දෙකක් තිබේ.DYY-2CසහDYY-6Cබල සැපයුම.
මේ අතර, Beijing Liuyi ජෛව තාක්‍ෂණය පාරිභෝගිකයින් සඳහා සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලයක් සපයන අතර සෙලියුලෝස් ඇසිටේට් පටලයේ ප්‍රමාණය අභිරුචිකරණය කළ හැකිය. සාම්පල සහ වැඩි විස්තර සඳහා අපෙන් විමසීමට සාදරයෙන් පිළිගනිමු.
Beijing Liuyi සන්නාමය චීනයේ වසර 50 කට වැඩි ඉතිහාසයක් ඇති අතර සමාගමට ලොව පුරා ස්ථාවර සහ උසස් තත්ත්වයේ නිෂ්පාදන සැපයිය හැකිය. වසර ගණනාවක සංවර්ධනය හරහා, එය ඔබේ තේරීමට සුදුසුයි!
අපි දැන් හවුල්කරුවන් සොයමින් සිටිමු, OEM ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් ටැංකිය සහ බෙදාහරින්නන් යන දෙකම සාදරයෙන් පිළිගනිමු.
ඔබට අපගේ නිෂ්පාදන සඳහා කිසියම් මිලදී ගැනීමේ සැලැස්මක් තිබේ නම්, කරුණාකර අප හා සම්බන්ධ වීමට පසුබට නොවන්න. ඔබට විද්යුත් තැපෑලෙන් අපට පණිවිඩ එවිය හැක[ඊමේල් ආරක්ෂිත]හෝ[ඊමේල් ආරක්ෂිත], හෝ කරුණාකර +86 15810650221 ට අප අමතන්න හෝ Whatsapp +86 15810650221 එක් කරන්න, හෝ Wechat: 15810650221
පසු කාලය: සැප්තැම්බර්-20-2023